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細(xì)胞培養(yǎng)的常見問題及解決方法

更新時間:2023-10-26點(diǎn)擊次數(shù):1055
  你知道細(xì)胞培養(yǎng)的常見問題及解決方法嗎?讓我們一起來看看吧!
  一、培養(yǎng)細(xì)胞不貼壁
  原因:
  1.胰蛋白酶消化過度;
  2.支原體污染;
  解決方法:
  1.縮短胰蛋白酶消化時間或降低胰蛋白酶濃度;
  2.分離培養(yǎng)物,檢測支原體。清潔支架或培養(yǎng)箱。如發(fā)現(xiàn)支原體污染,丟棄培養(yǎng)物;
  二、懸浮細(xì)胞成簇
  原因:
  1.培養(yǎng)液中含鈣,鎂離子;
  2.支原體污染;
  3.蛋白酶過度消化使得細(xì)胞裂解;
  解決方法:
  1.用無鈣鎂平衡鹽溶液洗滌細(xì)胞,輕巧吹吸
  2.細(xì)胞獲得單細(xì)胞懸液;
  3.分離培養(yǎng)物,檢測支原體;
  三、培養(yǎng)細(xì)胞生長緩慢
  原因:
  1.由于更換不同培養(yǎng)液或血清;
  2.培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長必須成分如谷氨酰胺或生長因子耗盡或缺乏或已被破壞;
  3.培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染;
  解決方法:
  1.比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清支持細(xì)胞生長實(shí)驗(yàn),讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液;
  2.換入新鮮配置培養(yǎng)液,或補(bǔ)加谷氨酰胺及生長因子;
  3.用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,丟棄培養(yǎng)物;
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